ABSTRACT
A total of 200 moribund rainbow trout with clinical signs of a hyperacute haemorrhagic septicemia were collected from rainbow trout farms in Fars, Kohkiloyeh-Boyer Ahmad and Charmohal-Bakhtiari provinces in the south and southwest of Iran during summer 2002 to winter 2008 for detection of Lactococcus garvieae, the causative agent of lactococcosis. Fish kidney samples were cultured aseptically onto brain heart infusion agar plates and incubated at 25°C for 48 h. Using conventional biochemical tests, L. garvieae was detected from 32 fish [16% of total fish samples]. Additionally, isolates were confirmed as L. garvieae using a specific PCR assay based on 16S rDNA gene by producing a single band of 1107 bp. Partial analysis of 16S rDNA revealed 100% sequence similarity for all Iranian isolates and there was a close genetic relationship among these isolates and those previously reported from mullet in Taiwan [AF352166] and yellowtail in Japan [AB267897] based on GenBank data. Results of antibiogram tests on L. garvieae isolates showed a high susceptibility to erythromycin, enrofloxacin, chloramphenicol and clarithromycin. In pathogenicity tests, immersion of fish in a bacterial suspension of 6x10[5] colony forming unit/ml of L. garvieae in challenge experiments showed 60% mortality during 14 days post-infection. Experimentally, infected fish showed typical blackening of skin haemorrhages, exophthalmia and wide haemorrhages on viscera. The present study provides useful molecular and biochemical information for L. garvieae isolates in Iran compared with those from different hosts and geographic locations
Subject(s)
Animals , Lactococcus/isolation & purification , Hemorrhagic Septicemia/veterinary , Polymerase Chain ReactionABSTRACT
O presente estudo teve por objetivo relatar um caso sobre as alterações morfológicas em leucócitos de kinguio comsepticemia hemorrágica bacteriana. Um exemplar foi atendido no Laboratório de Patologia de Organismos Aquáticos doCAUNESP, Unesp de Jaboticabal, apresentando apatia, natação errática, anorexia e discreta perda de equilíbrio, buscandoconstantemente a superfície da água. Através de análise visual da superfície corpórea, foram observadas áreas de hemorragiapetequial na base das nadadeiras peitoral, pélvica e caudal, além da órbita bucal, periocular e anal e efusão celomática. Naextensão sanguínea foram observadas a presença de monócitos ativados, hiperativados, e fagócitos mononuclearesrealizando eritrofagocitose e leucofagocitose, neutrófilos com basofilia citoplasmática e com vacuolização citoplasmática,além de imunócitos e leucócitos imaturos com anisocitose e anisocariose. As alterações morfológicas descritas no presenteestudo revelaram parte da patogenia e resposta orgânica de kinguio com septicemia hemorrágica bacteriana. Dessa forma,as análises qualitativas das células sanguíneas devem ser também utilizadas como ferramenta complementar aos estudosdo estado geral da saúde de peixes em cultivo.
The morphological changes in leukocytes of goldfish with bacterial hemorrhagic septicemia were reported. One sample was served at the Laboratory of Pathology of Aquatic Organisms of CAUNESP, Unesp in Jaboticabal. The fish showed lethargy, erratic swimming and without force, slight loss of balance, trying constantly to the water surface. In the body inspection, areas of petechial hemorrhage at the base of the pectoral fins, pelvic fins and caudal fin were observed, beyond the periocular and oral orbitand anal. Blood smears presented hiperactivated monocytes, performing erythrophagocytosis and leukophagocytosis, the cytoplasm of neutrophils presented basophilia and vacuolization, beyond immunocytes, immature leukocytes with anisocytosis and anisokaryosis. The morphological changes described in this study revealed part of the pathogenesis and organic response of Kinguio with bacterial hemorrhagic septicemia. Then, the qualitative analysis of blood cells should also be used as a complementary tool to study the general health status of fish farmed
Subject(s)
Animals , Goldfish/abnormalities , Hemorrhagic Septicemia/immunology , Hemorrhagic Septicemia/veterinaryABSTRACT
Uma amostra genuína chinesa foi adaptada em cultura de células de linhagem de rim de coelho (RK13), através de passagens sucessivas e clonagem, na temperatura de 37§ C. Na décima passagem, após a clonagem, a semente foi liofilizada e estocada a - 70§ C. A partir dessa semente, entäo denominada da Cepa Porto Alegre (CPA), foram produzidas várias suspensöes víricas com as quais preparou-se uma vacina experimental. As características "in vitro" e "in vivo" da amostra CPA foram entäo estudadas. "In vitro", a amostra de vírus cresce regularmente em células RK13, demonstrada pelo teste e imunofluorescência direta com formaçäo de grandes placas de células com citoplasma fluorescente. Entretanto a amostra CPA näo cresceu em células PK15 nas primeiras 5 passagens. "In vivo" a amostra CPA näo provocou fluorescência em tecido de suínos vacinados, mas é hipertermizante para coelhos. O vírus liofilizado resistiu bem a 27§ C, durante 5 meses e por 12 meses na temperatura entre 15 e 36§ C. Reconstituído com o respectivo diluente e mantido a 25-26§ C, manteve título infeccioso estável por 24 horas e conferiu 100//de proteçäo em vacinas até 72 horas pós diluiçäo. Esta amostra näo mostrou virulência residual para suínos imunodeprimidos e é inócua para porcas gestantes, a partir de 40 dias da cobertura. Näo possui capacidade de difusäo de suíno para suíno, e näo foi possível recuperar o vírus de órgäos de suínos, após 42 dias de vacinaçäo. A amostra CPA só pode ser recuperada do suíno, através de inoculaçäo de macerado de baço em coelhos, por via endovenosa. Os suínos vacinados e desafiados 14 dias após foram 100//protegidos, näo havendo pique febril causado pelo vírus de desafio